전신 내분비 유전 면역 비만

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유전질환 ; 핵산 교잡법

작성자 닥터코리아 조회수 2056

【 핵산 교잡법nucleic acid hybridization 】


이중 나선 구조의 DNA 단편(native DNA)을 알칼리 혹은 열 처리를 가하면, 두 가닥이 분리되어 단쇄 DNA(denatured DNA)로 변성된다.

 

분리된 단쇄 DNA를 핵산 교잡이 가능한 조건으로 배양시키면, 변성되었던 DNA의 염기들이 상보적인 염기와 쌍을 이루어서 다시 이중나선 구조를 되찾게 된다.


단쇄 DNA는 전체의 1/10,000에 불과한 RNA나 DNA에 특이적으로 결합할 수 있다.


많은 DNA 재조합법을 이용한 연구들은 방사능 혹은 biotin으로 표지된 단쇄의 핵산, 즉 표식자를 이용하고 있다. 
                                                                                       DNA 구조

 핵산 교잡법으로 표식자와 완전히 혹은 부분적으로 일치하는 염기 서열을 구분하여 동정할 수 있으며, DNA 분획법 및 DNA증폭과 함께 수만 개중의 하나의 유전인자를 찾을 수도 있고, 사람의 세포 1개당 1개미만으로 존재하는 병원성 미생물의 염기 서열도 확인할 수 있다.

핵산 교잡법에 allele specific oligonucleotide(ASO) 표식자를 이용할 수도 있다. ASO 표식자는 보통 15-20 염기로 구성된 단쇄의 합성 oligonucleotide이다. 보통 2개의 oligonucleotide를 합성하는데, 돌연변이 부위에서만 서로 다르게 합성한다. 하나는 정상 염기 배열과 일치하도록 하고, 다른 하나는 돌연변이 염기 서열과 일치하도록 한다.

교잡 조건은 완전히 일치하는 oligonucleotide만 결합되고, 하나의 염기라도 일치되지 않는 경우에는 결합하지 않도록 조절한다.

ASO 표식자는 Southern blotting이나 DNA 증폭과 병용할 수도 있다.