법의학과

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법의학: 독물 분석 방법

작성자 닥터코리아 조회수 4406

독물 분석 방법

 


(1) 알코올 Alcohol



1) 중크롬산칼륨법 Patassium dichromate method
① 중크롬산칼륨 포화수용액 1ml, 혈액1ml 혹은 요 1ml를 플라스크 내에서 혼합
② 0.1N 중크롬산칼륨, 60%황산 수용액 0.5ml 첨가
③ 플라스크를 밀페 50℃로 가열
결과판독 : 적황색(orange)에서 녹색으로 변색되면 주정 ehtanol치가 50mg%이상을 의미한다.

 

 


(2) 중금속 : arsenic, bismuth, antimony, mercury


1) Reinsch 검사법
① 요나 위장내용물 ·신장 혹는 간장 조직 10ml(또는 gm)를 플라스크에 넣음
② 플라스크에 농축염산 2ml를 넣은 후 동선 혹은 동판 첨가
③ 플라스크를 밀봉  1시간 동안 가열
결과 판독 : 검사 결과가 양성일 경우 동선 또는 동판상에 침전물이 형성된다.


2) 비소 Arsenic
비소에 의해 형성된 흑회색의 동선 내지는 동판을 시험관에 넣고, 10% 청산칼륨 15방울을 가함

비소에 의해 생성된 침전물은 용해되지만, antimony, bismuth에 의하여 생긴 침전물은 용해되지 않는다.


3) 창연 Bismuth
창연에 의해 형성된 은회색의 동판을 시험관에 넣음

5% 아황산나트륨 15방울과 15% 질산 1ml를 가함

비스무스에 의하여 생성된 침전물은 용해되나 비소 혹은 antimony에 의하여 형성된 침전물은 용해되지 않는다.

 

증류수 1ml와 창연 검사시약(창연검사시약 : 0.5%질산 100ml에 quinine sulfate 2gm을 용해한 후, 여기에 옥도칼륨 2gm을 다시용해) 1ml를 가하면 오렌지색의 혼탁이 형성된다.

이 방법은 창연검출의 특유한 검사법이다.

4) Antimony
침전물이 비소 및 창연 검출법으로 변화를 나타내지 않을 때는 antimony에 의해서 생성된 침전물이다.

 


(3) Batbiturates 수면제

Koppany법
① 깔대기로 요 혹은 위내용물 50ml를 여과한 후 litmus지로 pH를 측정

② 에테르 100ml를 가함 수분간 흔들어 줌
③ 분리층이 형성되면 수용액 층을 버림, barbiturate는 잔류층내에 남게 됨
④ 에테르를 비이커에 여과한 후 수조내에 넣고 에테르를 증발시킴
⑤ 건조된 barbiturate 잔여물을 클로로포름 10방울을 가하여 다시 용해시킴
⑥ 클로로포름 용액을 백자로 만든 점적판 위에 몇 방울을 떨어뜨린 후 1% cobalt acetate, 무수메칠알콜 용액 한 방울과 5% isopropyl amine용액 두 방울을 가함
결과판독 : barbitutrate 존재하에 자색 내지는 연자색(purple lilac color)을 나타낸다.

 

 


(4) 일산화탄소 Carbon monoxide

1) Hoppe-Seyler법
방법-Ⅰ:

증류수 20ml에 혈액 2방울을 희석하여 시험관에 넣음

다른 시험관에 COHb이 없는 정상대조혈액 2방울을 가함

두 시험관에 광선을 비추어 봄

carboxyhemoglobin이 있는 혈액은 명확한 선홍색을 나타냄 대조혈액은 적갈색을 나타냄.

방법-Ⅱ:

증류수 10ml에 혈액 2방울을 희석하여 시험관에 넣음

다른 시험관에 동일한 방법으로 대조혈액 동량을 넣음

각 시험관에 0~20% 수산화나트륨 5방울을 가함 빨리 흔듦

대조혈액은 황갈색을 나타냄

검사혈액이 20% 이상이 COHb를 함유하고 있다면 선홍색이 수초간 지속된 후 약 1분 후 선홍색이 황갈색으로 변함


2) Kunkel법
3% tannic acid용액 10ml 20% 희석혈액 5ml를 가하여 선홍색으로 변하면 COHb 양성

대조혈액은 직후에는 염적색이나 점차 회갈새으로 변함

3) Liebmann법
40% formalin용액에 혈액을 가하여도 그 빛깔에 변화가 없는 것은 COHb 양성



(5) 청산염 Cyanide
1) 부검실에서 시행하는 간이검사법

① 여과지를 포화피크린산(picric acid)에 담근 후, 건조시킴
② 여과지상에 혈액·위 내용물 같은 검사재료 한 방울을 떨어뜨린 후 다시 건조시킴.
③ 검사물 중심부에 10% sodium carbonate 한 방울을 떨어뜨림.
결과판독 : 청산염 존재하면 검사물 중심부에서부터 적자색으로 점차 착색됨

2) Schonbein-Pagenstecher 반응
Guajac 시험지가 청색으로 변하면 양성

3) Benzidine 반응
benzidine초산동시험지가 청색으로 변하면 양성


(6) Isopropyl alcohol

1) Denige’s 법
① 10% zinc sulphate 5ml와 혈액 5ml를 혼합
② 0.5N 수산화나트륨 5ml를 가하여 혼합
③ 단백질을 완전히 응고시킨 후 여과지로 여과.
④ 원심시험관에 투명한 여과액 5ml를 취하고 Denige’s 시약 5ml를 첨가.
⑤ 크르크 마개를 하여 수조에 넣고 서서히 가열
결과 판독 : isopropanol, acetone,  tertiary butyl alcohol 존재 하에 황백색의 미세침전물 (fine precipitate)이 형성 검사결과가 음성일 경우 isopropanol이 존재치 않음.

 


(7) 납성분 Lead

1) 간이검사법

① 검사재료에 약황산을 가하면 백색 침전물 형성

    침전물은 질산에는 용해되지 않음

    염산(hydrochloric acid) 혹은 ammonium acetate에는 용해됨
② 검사재료에 sulfuretted hydrogen을 가하면 흑색 침전물이 생성됨

    침전물은 ammonium sulfide에는 용해되지 않음

    뜨거운 질산에는 용해됨
③ 검사재료에 potassium iodide를 가하면 밝은 황색 침전물이 형성됨

     침전물은 뜨거운 증류수에 용해되는데 다시 냉각시키면 반짝이는 황색 결정체가 형성됨


2) 요 coproporphyrin 검사

① 요 5ml에 초산 10방울과 3% 과산화수소 5방울을 시험관 내에서 혼합

     에테르 5ml를 첨가하여 가볍게 흔들어 줌
② 층이 분리되도록 방치 층이 분리되면 요충은 버림
③ 에테르에 1N 염산 1ml를 가한 후 자외선 하에서 관찰(Wood’s filter).

 


(8) 목정 Methyl alcohol

혈액내 목정 검사법 Test for methyl alcohol in blood
① 혈액 2 ml에 20% trichloracetic acid 4 ml를 가하고 잘 혼합함.
② 여과하여 투명한 여과액을 얻음.
③ 시험관 내에서 여과액 1ml와 과망간산칼륨 시약 4방울을 혼합한 후 2분간 작용시킴
④ 소량의 아황산나트륨(sodium bisulfate)결정체를 사용 과망간산칼륨을 탈색시킴.
⑤ chromotrophic acid 소량 첨가
⑥ 황산 2ml를 시험관 측벽을 따라 유입시킴
결과 판독 : 목정 존재하에서는 접촉부위에서 흑자색 고리가 형성됨

 


(9) 파라티온 Parathion

P-nitrophenol 검사법 P-nitrophenol test
① 토한 내용물 ·위 내용물 또는 요 10~15 ml를 증기로 증류시킴

    증류액 10ml를 얻음
② 수산화나트륨 2정을 가한 후 서서히 가열
결과 판독 : P-nitrophenol, 파리티온의 대사물 존재하에 황색을 나타냄

 


(10) Phenothiazine

요 phenothiazine 검사

① 요 2ml에 농축황산 6방울과 10% ferric chloride 2방울을 가함

    선홍색 내지 자색을 나타내면 phenothiazine화합물에 대한 양성반응을 의미함
② 5% ferric chloride 5 ml, 20% 질산 45 ml, 50% 질산 50ml를 혼합하여 FPN시약을 만든다

결과 판독 : 요 1ml에 FPN시약 1ml를 혼합하였을 때, 염소화물유도체(chlorinated derivatives)가 있으면 피부색(flesh color), 유황화합물유도체(sulfurated derivatives)인 경우 청색 내지는 오렌지 색을 나타낸다. 이러한 색의 변화는 곧 소실된다.

 


(11) Salicylates

1) Phenistix 검사
염화제이철 검사 (ferric chloride test)

요 2~3 ml에 10% 염화제이철 1 ml를 혼합

salicylic acid가 요내에 존재하면 짙은 자색을 나타냄

양성을 나타내면 요검사물을 끓여셔 검사를 반복함

아스피린(aspirin) 5 gm 섭취에도 양성을 나타냄

석탄산 유도체에 의해서도 양성반응을 나타냄

음성반응은 salicylate가 요 중에 존재치 않음을 의미함.

2) 혈청 살리실산 검사

① 정성분석 (qualitative test)

증발접시에 혈청 0.01 ml를 넣고 0.07N 질산에 용해된 1% 질산제이철(ferric nitrate) 2방울을 가함

결과 판독 : salicylate 존재하에 자색을 나타냄


② 정량분석(quantitative test)

두 개의 시험관에 혈청 0.2ml와 증류수 0.8ml를 넣음

한 시험관에는 0.07N 질산(nitric acid) 1ml를 가함

다른 시험관에는 0.07N 질산에 용해된 1% 질산제이철 1ml를 가함

잘 흔들어서 혼합한 후 5분간 방치

분관비색계를 사용하여 파장 540 mμ에서 판독