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소변의 Acetone 체 (ketone bony)

작성자 닥터코리아 조회수 2358
【 소변의 acetone체 (ketone body) 】



Ketone체 ; 지방대사 산물로서 acetoacetic acid, β-hydroxybutyric acid 및 acetone 등으로 구별한다.
Acetone과 acetoacetic acid는 1 : 10의 비율로 요 중에 나타나며, 정상뇨 중의 acetoacetic acid 농도는 10mg/dl 이하이다.

Liver glycogen이 감소되면 지방대사 산물인 이들 ketone체의 산화가 저지되어 혈류 중에 축척된다. 이것이 요로 배설되면 케톤뇨(ketonuria)가 되고, 이 현상을 ketosis라고 한다.

Ketosis 때 신선한 요에는 acetone보다 오히려 acetoacetic acid나 β-hydroxybutyric acid가 많으며, 요를 장시간 방치해 두면 이들이 분해되어 acetone이 많아진다.

만일 routine urinalysis에서 sugar가 발견 될 때는 ketone체가 나올 가능성이 있으므로 따로 검사의뢰가 없더라도 이에 대한 검사를 하는 것이 좋다.


( 검사 방법 )

(1) Large nitroprusside test

① 시험관에 증류수를 몇 방울 취하고, sodium nitrorusside 결정 몇 개를 넣어서 용해시킨다. 이 용액은 cherry red 색이 된다.
② 요 4∼5ml를 가해서 혼합한다.
③ 강 ammonium hydroxide를 중첩시킨다.
④ 접촉면에 purple ring이 생기면 양성반응을 의미한다.
⑤ 이 시험에서는 acetone과 acetoacetic acid가 다 양성 반응을 일으키므로, 만약 양성 일 때는 acetoacetic acid에 대한 검사를 다시 하도록 한다.
⑥ 결과는 1+에서 4+까지 구분한다.


(2) Rothera test

① 요 5ml 에 1g정도의 ammonium sulfate 를 가해서 포화시킨다.
② Sodium nitroprusside 용액 2∼3방울을 가해서 혼합한다.
③ 강한 ammonium hydroxide를 중첩시킨다.
④ Reddish purple ring이 생기면 양성이다.


(3) Sodium nitroprusside test

혈장을 가검물로 할 때 쓸 수 있는 검사법이다.
① 2방울의 혈장이나 혈청을 시험관에 취한 후 ammonium sulfate 결정체를 가하여 과포화 supersaturation 시킨다.
② 2방울의 5% nitoprusside액을 가하여 혼합한다.
③ 2방울의 강한 ammonium hydroxide를 가해서 흔들어 혼합한 후 3분간 방치한다.
trace....................... permanhannate색
moderate.............. 연한 청색 light blue
large amount........진한 청색 deep blue


(4) Gerhardt ferric chloride test

이 시약은 acetone과는 반응하지 않는다.

① 시험관 2/3의 뇨를 acetic acid로 산성으로 만든다.
② Phosphate가 침전될 때까지 10%의 ferric chloride 액을 가한다. 착색이 생기면 색이 없어질 때까지 요를 더 넣는다.
③ 여과한 후 여액을 두 시험관에 나눈다.
하나는 대조로 두고, 다른 하나에는 ferric chloride액을 가한다.
④ Cherry red 또는 Bordeaux-wine 색이 나타나면 양성반응으로 acetoacetic acid 또는 어떤 성분의 약제의 존재를 의미한다.
⑤ 따로 10ml 의 요를 산성으로 만들고 같은 양의 증류수를 가한다.
⑥ 열을 가하여 요가 1/2 정도로 줄어들게 한다.
⑦ 이것을 식힌 후 원래의 양인 10ml가 되게 증류수를 가한다.
⑧ ②의 조작에서와 마찬가지로 phosphate 를 침전시키고 여과하다.
이 여액을 대조 시험관과 같은 양을 취하여 여기에다 ⑤의 조작에서처럼 ferric chloride 액을 가하고 세 시험관을 비교한다.
⑨ Diacetic acid로 인한 것이었다면, 이 마지막 시험관은 음성이거나 아주 희미할 것이고, 약제로 인한 것이었다면 열을 가하지 않고 검사한 것과 비슷하게 된다.

이 방법은 diacetic acid는 열을 가하면 산화되어 ferric chloride와 작용하여 색을 나타낼 수 없는 acetone으로 되지만, 약제는 열을 가해도 변하지 않는 점을 이용한 것이다.

색반응에 관여하는 약제로는 phenol, antipyrin, coal tarantipyretic, bicarbonate, salicylate, acetate, cyanate 등이 있다.


(5) Hart test(B-hydroxbutyric acid)

① 20ml 뇨를 빙초산으로 산성화하고, 같은 양의 증류수를 가한 후 10ml 정도로 줄 때까지 증발시킨 후 다시 식혀서 증류수를 가하여 원래 양(20ml)으로 만든다.
② 두개의 시험관에 나눠 그 한쪽에 30% H2O2 1ml를 넣고 가온했다가 식힌다. 이 때 β-hydroxybutyric acid는 acetone으로 변한다.
③ 두 시험관에 30% acetic acid 10방울과 sodium nitroprusside 포화용액(45g/100ml) 10방울씩을 가하고, 그 위에 30% ammonium hydroxide 용액을 중첩시킨다.
④ 만일에 β-hydroxbutyric acid가 있으면 H₂O₂를 넣은 쪽만 purple-redring이 생긴다.


(6) Ketur-test(Boehringer Mannheim Co)

Legal test의 원리를 기초로 한 것으로 sodium nitroprussiate가 glycine과 alkali 완충액 내에서 acetone 및 acetoacetic acid와 반응하여 적자색으로 농도에 따라 변색되는 것을 이용한 것이다.

변색구분 acetoacetate (ma/dl)
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- 0∼5
+ 5∼35
++ 35∼100
+++ >100
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(7) Acetest 와 Ketostix

Actest는 nitroprusside test를 위한 tablet로 sodium nitroprusside, glycine, disodium phosphate 와 lactose로 구성되어 있다.
이 정제를 요 한 방울로 축여서 30초 후에 표준색조와 대조 판독한다.

번색구분 acetoacetic acid (mg/dl) acetone(mg/dl)
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- negative + weak 10-20 25-50
++ average 25-40 200-250
+++ strong >50 400-1,000
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전혈을 가지고도 검사할 수 있다.
Ketostix는 nitroprusside test를 위한 strip 이다.
원리는 Ketur-test와 같고, acetest 보다 반응시간이 빨라 15초에 판독한다.

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변색구분 acetozcetic acid(mg/dl) acetone(mg/dl)
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- negative + weak 10-20 80-40
++ moderate 30-50 320-820
+++ strong 80-120 1,600-2,400
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