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담즙색소 Bile pigment

작성자 닥터코리아 조회수 6299
【 담즙색소 Bile pigment 】



Bilirubin은 파괴된 혈색소를 재료로 망상직내피세포계reticuloendothelial system에 의해 생성된다.
Bilirubin은 nonconjugated protein bound form으로 혈장에 들어간 후 간에서 glucuronic acid와 결합하여 bilirubin diglucuronide가 된다. 이것은 conjugated bilirubin이며 bile의 한 성분으로서 십이지장에 배설된다.
장관에 들어온 bilirubin은 장내 세균에 의하여 urobilinogen(stercobilinogen)으로 환원된다.
Urobilinogen의 일부는 stercobilin으로 되어 stool 중에 배설되고,P urobilinogen의 대부분은 재흡수되어 간으로 간다. 간에서 대부분은 bile 속에 다시 배설된다. 나머지 일부가 대순환계로 들어가 요로 배설되는데 이것이 urobilinogen이다. 이것은 산화하면 urobilin이 되기도 한다.

Gmelin test, Iodine test, Fouchet test 들은 bile pigment가 oxidizing agent로 처리되었을 때 청색 또는 녹색 물질을 형성함을 이용한 검사들이다.


〔 검사법 〕

1. Gmelin test

여과하지 않은 뇨 약 2ml를 시험관에 넣고, 발열질산yellow mitric acid 1∼2ml를 흘려 넣는다. 이 때 bile이 있으면 접촉면에 녹색 ring이 생기고 다음 층은 적색이 된다.
Acid 쪽으로 황색 ring이 생기는 상당히 예민한 검사이다.

Thymol의 색반응은 녹색이 발열질산쪽을 향해 일어나므로 구별된다.
Formalin은 황색 ring이 생기고, indican이나 다른 색소들도 어떤 ring을 나타낼 수 있으나 bile의 경우와는 구별이 된다.

발열질산 만드는 법 ; 질산에다 소나무 조각(보통 설압자를 이용)을 넣어두면 된다.


2. Rosenthal의 변법 Gmelin test

많은 양의 요를 여과한 후 그 여과지가 거의 건조한 후 그 위에 yellow nitric acid를 떨어뜨리면 가장 자리로 녹색이 나타나고, 중앙으로 가면서 적색, 황색의 순서로 착색된다.
요 중에 potassium iodide가 있으면 초록색을 띠고 이어서 청색으로 변하기도 한다.


3. Harrison의 변법 Gmelin test

Urine 10ml에 barium chloride 1g를 가하여 혼합한 후에 여과하고, 이 여과지가 약간 건조되면 그 침전물 위에다 약간의 Fouchet reagent나 발연질산을 떨어뜨린다.
Biliverdin의 녹색이 나타나면 bile(bilirubin)양성이다.

Fouchet reagent
trichloroacetic acid .................... 25g
ferric chloride, 10%수용 액...... 10ml
distilled water .............................100ml


4. Iodine test

Indican 또는 다른 pigment가 Gmelin test를 방해할 때 이 검사를 한다.

필요하면 요를 초산으로 산성화시키고, 0.5% 희석 tincture iodide를 넣은 시험관에 관벽을 통해 요를 밑바닥으로 흘러 들게 한다.
Bile이 있으면 짙은 녹색(emerald green color)이 나타난다.


5. Bilur-test (Boehringer Mannhein Co.)

Bilirubin이 산성 하에 2,6-dichlorobenzole diazonium fluoborate와 반응하여 적자색 내지는 자색으로 변하는 azo dye를 이루는 것이다.
요를 적신 후 30초 후에 표준색조와 대조 판독한다.

변색 bilirubin
----------------
- <0.2
+ 0.2∼1
++ 1∼2
+++ >2
-----------------


6. Intotest와 Intosix(Ames Co.)

Intotest
; Bilirubin이 p-nitrobenzole diazonium-p-toluene sulphonate와 반응하여 청자색의 azobilirubin이 되는 것을 이용한 것이다.
Cellulose-asbestos 여과지 위에 가검뇨 5방울을 떨어뜨리고 table을 올려놓는다.
증류수 두 방울로 적신후 30초 이내에 tablet 주변에 청자색 환이 형성되면 양성이다.

Bilirubin 농도 ; 요에서는 0.1mg/dl, 혈청은 1mg/dl 까지 양성반응을 보인다.

Ictostix
; 요의 bilirubin을 strip법으로 검출하는 것.
Bilirubin농도에 따라 황갈색에서 갈색으로 변색한다.